Práticas de Microbiologia (2ª edição)
Seção 2 | Prática
Ácidos orgânicos: acético, pH ácido com inibição do Preservação de cafés, bolos,
láctico, propiônico, crescimento microbiano queijos, sucos de frutas,
benzoico, sórbico e seus geleias, molhos,
sais margarinas
Nitratos e nitritos Formam ácido nitroso e óxido Preservação de carnes
nítrico, que são substâncias curadas, como presunto e
oxidantes bacon
Gás sulfeto, metabissul to e Redução de pontes dissulfeto Preservação de sucos, vinhos
SO2 em proteínas e frutas secas
SEÇÃO 2 | PRÁTICA
Ação do calor nas bactérias
Objetivo
Testar diferentes métodos que empreguem o calor no controle do crescimento de formas vegetativas e nos endósporos.
Material
■ Autoclave
■ Banho-maria
■ Pipetas de 2 mℓ
■ Bico de Bunsen
■ Tubos de ensaio (5 mℓ) com meio de cultura (caldo de carne)
■ Bactéria: Escherichia coli e Bacillus subtilis ■ Estufa de incubação.
Procedimentos
Esta prática deve ser feita para os dois microrganismos. Cada grupo escolhe um tipo de bactéria:
■ Escherichia coli
■ Bacillus subtilis.
Separar quatro tubos com o meio de cultura estéril e inocular cada um com duas gotas de cultura. Em seguida, os meios inoculados devem ser submetidos às diferentes condições listadas a seguir e incubados por 24 a 48 horas, a 37°C:
■ Tubo 1: controle
■ Tubo 2: banho-maria, 100°C, 5 minutos
■ Tubo 3: banho-maria, 100°C, 20 minutos
■ Tubo 4: autoclave, 20 minutos.
Interpretação dos resultados
A Escherichia coli foi eliminada após aquecimento em banho-maria a 100°C, por 20 minutos e na autoclave. Pode crescer ainda no tempo de 5 minutos. O Bacillus subtilis cresceu no tubo aquecido em banho-maria por 5 e 20 minutos, sendo eliminado apenas após a autoclavação. Esses
resultados estão demonstrados na Figura 3.32. A maior resistência ao calor do Bacillus subtilis se deve à capacidade de esses microrganismos esporularem.
Figura 3.32 A. Escherichia coli. B. Bacillus subtilis. A bactéria E. coli cresceu no tubo 1 (tubo-controle) e no tubo 2 (5 minutos de aquecimento), enquanto a B. subtilis cresceu nos tubos 1, 2 (5 minutos) e 3 (20 minutos). Todas as bactérias foram eliminadas pela autoclave (tubos 4).