Manual de Sobrevivência no Laboratório de Química Orgânica: Guia de Técnicas para o Aluno
Visualização e Coleta
da areia. Em nenhum momento deixe o solvente ficar abaixo da
camada superior de areia! O composto agora está “na coluna”.
3. Agora, adicione o eluente (solvente) à coluna, acima da areia. Não
agite a areia! Abra a torneira ou a braçadeira. Lentamente, deixe o
eluente correr pela coluna, até que saia o primeiro composto. Recolha
os diferentes produtos em Erlenmeyers. Pode ser que você precise de
muitos desses frascos. Em momento algum deixe o nível do solvente
ficar abaixo do topo da areia! Se necessário, interrompa o
escoamento, adicione mais eluente e reinicie o escoamento.
VISUALIZAÇÃO E COLETA
Se os compostos forem coloridos, você poderá vê-los percorrendo coluna abaixo e se separando. Se um deles ou todos forem incolores, você terá problemas. Assim,
1. Eventualmente, pingue uma ou duas gotas de eluente em uma lâmina
de microscópio limpa. Evapore o solvente e veja se há algum sinal de
cristais do seu composto! Esse é um excelente teste, mas não se
confunda com os irritantes plastificantes da tubulação (Fig. 28.2) que
tentam fazer você acreditar que são seu produto.
2. Coloque a ponta estreita de um “marcador de CCF” próximo de uma
gota que sai da coluna. A gota vai subir pelo tubo. Utilizando esse
marcador, manche, revele e visualize uma placa de CCF com ele. Não
só ele é mais sensível, como também você consegue ver se aquilo que
sai da coluna é puro ou não (veja o Capítulo 27, “Cromatografia de
camada fina”). Provavelmente, você vai ter de recolher mais de uma
gota em uma placa de CCF. Se for muito diluída, a placa não vai CROMATOGRAFIA DE COLUNA:
mostrar coisa alguma, ainda que o composto esteja realmente lá. O
melhor é amostrar quatro a cinco gotas consecutivas.
Assim que o primeiro composto, ou compostos, tiver saído da coluna, os que restaram poderão mover-se coluna abaixo lentamente demais para fins práticos. Normalmente, você começa com um solvente apolar. Porém, no momento que todos os compostos tiverem saído, pode ser hora de pegar seu diploma de graduação. O solvente não pode ser tão polar para expulsar frações posteriores. Então, você tem de decidir mudar para um solvente mais polar. Este expulsará o composto para fora da coluna.
Para trocar de solvente no meio da corrida:
1. Deixe o nível do solvente anterior descer até ficar logo acima do topo
da areia.
2. Lentamente, adicione o novo solvente mais polar, e não agite a
areia.
Você, sozinho, tem de decidir se e quando trocar para um solvente mais polar. (Felizmente, às vezes alguém ensina.)
Se você só tiver dois componentes, comece com um solvente apolar, e quando tiver certeza de que o primeiro componente saiu completamente da coluna, troque para um solvente polar. Com apenas dois componentes, não importa qual a polaridade do solvente que vai ser usado para fazer o segundo componente sair da coluna.
Às vezes, o solvente evapora rapidamente e deixa um “floco” de
cristais em volta da ponta (Fig. 28.2). Simplesmente utilize um pouco de solvente novo para lavá-los para dentro do frasco coletor.
Agora, todos os componentes estão fora da coluna e em diferentes frascos. Evapore os solventes (sem chamas!) e veja! Ficou o material cristalino.
Desmonte a coluna. Limpe-a. Vá para casa.