Manual de Sobrevivência no Laboratório de Química Orgânica: Guia de Técnicas para o Aluno
Solventes
As células de UV-VIS são quadradas, com 1,0 cm de lado e podem ser feitas de vidro de quartzo, vidro flint ou plástico. Somente as células de plástico podem passar tanto a radiação UV como a visível, logo um único conjunto delas seria o mais prático. As células de plástico, embora baratas, não só impedem a passagem do UV como podem se dissolver em certos solventes.
Superficialmente, as células de quartzo e de vidro parecem ser as mesmas. Entretanto, se você segurá-las contra a luz e olhar no topo das células, as de quartzo são de um branco brilhante, enquanto as de vidro tendem a ser mais esverdeadas. Ajuste o espectrômetro para um comprimento de onda no UV (sugiro 254 nm, o mesmo comprimento de onda que você usaria para iluminar a substância fluorescente nas placas de CCF) e você vai obter muito pouco ou nenhum UV atravessando as células, se elas forem de vidro.
Em um espectrômetro de feixe duplo, pense sempre em ter pares de células equivalentes. Dessa forma, você elimina mais uma variável na obtenção do seu espectro. Como elas são quadradas, têm quatro lados, com dois lados opostos transparentes e dois translúcidos (vidro, quartzo) ou ondulados (plástico). Pode ser frustrante e potencialmente constrangedor que você esteja com problema de obter um bom espectro porque o feixe está atravessando os lados translúcidos. Gire as células a 90º e comece o processo novamente.
Solventes
Os solventes não devem ser opacos às regiões que você está examinando com o espectrômetro de UV-VIS. Você não pode necessariamente usar os onipresentes solventes do laboratório de orgânica empregados em reações, extrações e cristalizações. Eles podem conter traços de impurezas que têm suas próprias absorções e podem interferir no espectro de absorção de sua amostra. Você tem que usar solventes muito puros. Como a maioria das unidades de CLAE tem detectores de ultravioleta, solventes para CLAE devem ser considerados para serem usados em seu trabalho.