Manual de Sobrevivência no Laboratório de Química Orgânica: Guia de Técnicas para o Aluno
Preparação da Amostra para CLAE
FIGURA 31.3 Trap de bolhas comum.
PREPARAÇÃO DA AMOSTRA PARA
CLAE
Amostras para CLAE devem ser de líquidos ou soluções. Seria bom se o solvente em que você dissolveu sua amostra sólida fosse o mesmo que o eluente.
É absolutamente crucial que você faça uma limpeza prévia de sua amostra. Qualquer material decomposto ou insolúvel vai grudar ao topo da coluna, podendo envenenar continuamente futuras corridas. Existem algumas maneiras de manter sua coluna limpa.
1. O adaptador Swinney (Fig. 31.4). Esse cômodo dispositivo trava
uma seringa já cheia com sua amostra. Então, você empurra a
amostra lentamente por um filtro Millipore para reter partículas
insolúveis. No entanto, isso não vai livrar você do alcatrão solúvel,
que pode arruinar a coluna. (Ah, não confunda filtros Millipore com
os papéis que os separam. É embaraçoso.)
FIGURA 31.4 Adaptador Swinney e peças da seringa. (Observe a trava de Luer.)
FIGURA 31.5 O filtro da pré-coluna.
2. O filtro da pré-coluna ou coluna de proteção (Fig. 31.5). Adicione
uma coluna limpa cheia com exatamente o mesmo material da coluna
principal, e deixe essa pequena coluna ficar contaminada. Há algum
tempo, era comum removê-la, limpar a sujeira e o adsorvente e
reenchê-la com empacotamento de coluna novo. Hoje em dia, ela
simplesmente é descartada. De uma maneira ou de outra, você
realmente não sabe quando o lixo vai envenenar todo o filtro da pré-
coluna e então passar a arruinar a coluna de análise. A única forma de
descobrir se você tem de limpar a pré-coluna é retirá-la do
instrumento. Você realmente precisa limpá-la ou descartá-la muito
antes de os contaminantes começarem a aparecer na saída da pré-
coluna, ou coluna de proteção.