Manual de Sobrevivência no Laboratório de Química Orgânica: Guia de Técnicas para o Aluno
A Amostra no Computador
4. Comece ajustando o controle do atenuador para registros mais
sensíveis (números menores), e observe a linha no computador.
5. Se a leitura do computador sair do zero, use apenas o controle de zero
do CG para trazer o zero de volta na tela do computador. Não use o
software do computador para obter uma leitura do zero. Use apenas
o controle de zero do CG.
6. À medida que o atenuador alcança valores mais sensíveis de ajuste
(números pequenos), fica mais difícil ajustar a linha em zero usando
apenas o controle de zero do CG. Faça o melhor que puder com a
menor atenuação (maior sensibilidade) que conseguir para manter
um zero uniforme.
7. Normalmente, você não corre suas amostras em um CG com
atenuações de 1 ou 2. Esses ajustes são muito sensíveis e pode haver
então muito ruído elétrico — a linha fica pulando. Se o zero do CG
está bom em uma atenuação de 1, você vai correr suas amostras em
atenuações de 8, 16, 32 etc., e a linha de base não vai se deslocar se
você mudar a atenuação durante a corrida.
Agora que o atenuador foi ajustado para produzir picos da altura apropriada, você está pronto para continuar. Esteja apenas atento ao fato de que pode haver uma inversão de polaridade que pode fazer com que os seus picos mudem de direção.
A AMOSTRA NO COMPUTADOR
A análise básica de um CG por computador pode ser bem simples:
1. Marque seu ponto inicial. Isso é o mesmo que a marca que você
coloca nas placas para CCF para mostrar onde colocou sua amostra. PARÂMETROS, PARÂMETROS
Se você tem um pico de ar, marque seu ponto inicial ali. Se não tiver
um pico de ar, teria que ser aquele no momento em que seu
computador começar a coletar os dados. Você pode marcar o ponto
inicial em qualquer outro lugar? Alguns softwares permitem que você
marque o ponto inicial em qualquer lugar durante uma corrida. Para a
análise básica de obtenção do tempo de retenção, não estou certo do
quão útil isso poderia ser.
2. Marque os picos. Utilize o software para dar os tempos de retenção.
Normalmente você seleciona o topo do pico, clica com o mouse e lá
está — o tempo de retenção. Se você usou um pico de ar, pode fazer
com que o software informe que o pico de ar é o tempo = 0,0 e
começar a partir dali.
3. Obtenha as áreas. Às vezes, logo após ter identificado os picos que
você quer, selecionando-os, o software está pronto para imprimir as
áreas relativas dos picos. Em um CG com uma linha base bem-
definida e estável, isto é, provavelmente, tudo que você precisa. Se
você tem uma linha base flutuante ou picos malresolvidos (com
sobreposição parcial), os valores simples, calculados
automaticamente, podem não estar corretos.
4. Dê um tratamento às áreas. Novamente, você pode não ter que fazer
isso com um CG bemcomportado. De outra forma, você terá que
utilizar funções especiais para correção da linha base ou mesmo
funções de separação de picos existentes no software para obter
resultados mais exatos. Para a correção da linha base, você pode ter
que desenhar ou clicar uma linha base sob um pico específico antes
de permitir que o computador calcule a área sob o pico.
Com as áreas dos picos, você pode calcular quanto de cada composto está presente em sua amostra.