Manual de Sobrevivência no Laboratório de Química Orgânica: Guia de Técnicas para o Aluno
Preparação da Amostra para CG
FIGURA 30.1 Esquema de montagem de um cromatógrafo a gás.
PREPARAÇÃO DA AMOSTRA PARA CG
A preparação da amostra para CG não requer muito mais trabalho do que a manipulação de uma amostra a ser classificada. A amostra deve estar limpa e seca, certo? Verifique se o ponto de ebulição do material é suficientemente baixo para que você possa usar essa técnica. A temperatura máxima permitida depende do tipo de coluna, e esta deve ser dada. Na verdade, em qualquer experimento que use CG a natureza da coluna, a temperatura e a maioria dos ajustes eletrônicos devem ser fixados.
INTRODUÇÃO DA AMOSTRA NO CG
A amostra entra no CG pela porta de injeção (Fig. 30.2). Use uma seringa de microlitro para perfurar o septo de borracha e injetar a amostra na coluna. Não se fure, nem a ninguém, com a agulha. Não atire a seringa contra o septo. Há uma forma correta de fazer isso.
1. Para transferir a amostra, coloque a agulha na sua amostra líquida e
puxe o êmbolo lentamente, para que o conteúdo entre na seringa. Se
você for muito rápido e deixar entrar mais ar do que amostra, terá que
empurrar o êmbolo de volta e repetir a operação. Normalmente, você
terá uma seringa de 10 μL, e 1 a 2 μL de amostra são suficientes.
Afaste a seringa contendo sua amostra e, cuidadosamente, puxe o
êmbolo até que não haja mais material na agulha. Você deve ver um
pouco de ar na extremidade superior, mas não muito. Dessa forma,
você não corre o risco de seu composto vaporizar na agulha quando a
agulha entra no forno de injeção, ou seja, antes mesmo de ter injetado
a amostra. Essa injeção prematura dilui a amostra e diminui a
resolução. Além disso, o ar atua como um padrão interno. Uma vez
que o ar atravessa a coluna quase tão rápido quanto o gás carreador, o
pico de ar que você obtém pode sinalizar o início do seu
cromatograma, da mesma forma que a linha a lápis no início da placa
de CCF. Pergunte ao seu professor.
FIGURA 30.2 Esquema da porta de injeção de um CG.
2. Segure a seringa com as duas mãos (Fig. 30.3). Não há nenhuma
razão para tentar ser um médico em um laboratório de orgânica.
3. Traga a seringa ao nível da porta de injeção, na horizontal. Não
incline a seringa. Deixe então a agulha tocar o centro do septo.
4. O grande segredo é segurar o corpo da seringa e, sem injetar,
empurrar a agulha através do septo. Isso é mais fácil de escrever do
que fazer pela primeira vez. Perfure o septo cuidadosamente.
5. Agora, rápida e suavemente, empurre o êmbolo para injetar a amostra
e, então, remova a agulha da seringa do septo e da porta de injeção.
FIGURA 30.3 Três pequenas etapas em uma grande CG.
Depois de algum tempo, o septo fica cheio de buracos e começa a vazar. Normalmente você pode dizer que há vazamento no septo quando a linha no computador se movimenta ao acaso, sem nenhuma amostra ter sido injetada.