Vogel: Análise Química Quantitativa
7.8 Separação de carboidratos
pouco de amônia. A solução eluída, levada a um determinado volume em
um frasco graduado, pode ser usada para a análise colorimétrica ou
espectrofotométrica do corante recuperado (Cap. 17). Deve-se fazer uma
curva de calibração para cada um dos compostos.
7.8 Separação de carboidratos
Introdução Este experimento aplica-se a muitos carboidratos[9], porém,
os que escolhemos para demonstração produzem manchas bem definidas
com boa separação entre elas. A análise quantitativa é possível, fazendo-se
a calibração com o auxílio de soluções padrão dos carboidratos.
Aparelhagem
Placas de terra diatomácea (Kieselgel G ou Kieselguhr G)
Cuba cromatográfica (Fig. 7.2)
Micropipetas ou microcapilares
Produtos químicos
Solução de carboidratos: frutose, glicose, lactose, maltose e sacarose
(aproximadamente 0,1% de cada componente). Para as determinações
quantitativas use a faixa de concentração de cada carboidrato entre 0,01% e
0,2% peso/volume em água deionizada
Solvente de desenvolvimento: acetona: 1-butanol: água (50:40:10 por
volume)
Reagente de revelação: ácido tricloro-acético 20% em água e 1,3-di-
hidróxi-naftaleno 0,2% em etanol (50:50 por volume)
Procedimento Use uma micropipeta ou um microcapilar para aplicar a
mistura, as substâncias puras e os padrões quantitativos na linha de partida,
situada a 1,0-1,5 cm da aresta de uma placa de TLC de 20 cm × 20 cm.
Coloque a placa em uma cuba previamente equilibrada com o solvente de
desenvolvimento. Deixe a placa na cuba até que o solvente tenha alcançado
12-15 cm de altura na placa. Remova a placa, marque a frente de solvente e seque em estufa antes de borrifar o revelador. Os carboidratos devem se